Neue Protokolle verbessern die MicroRNA-Erkennung für die Diagnose

Laut einer heute veröffentlichten Untersuchung in Das Journal für Molekulare DiagnostikMicroRNAs (miRNAs), die Prozesse wie Entwicklung, Alterung und Befruchtung koordinieren, sind vielversprechend als Biomarker für Krankheiten. MicroRNAs können routinemäßig aus Flüssigkeiten wie Urin, Blut und Speichel gewonnen werden. In dieser Studie stellen die Forscher klare Methoden zur Sammlung und Untersuchung von miRNA vor, die ihre diagnostische Präzision erheblich verbessern.
Leitender Forscher Dominik M. Duelli, PhD, Abteilung für zelluläre und molekulare Pharmakologie, Chicago Medical School an der Rosalind Franklin Universität für Medizin und Wissenschaft, erklärt:

"Unsere Studie zeigt, dass inhärente Unterschiede in biologischen Proben und die Methoden zu deren Sammlung und Analyse den Nachweis und die Quantifizierung von microRNAs dramatisch beeinflussen können. Wir entwickelten Maßnahmen, um die störenden Aktivitäten zu überwinden und die Empfindlichkeit der miRNA-Erkennung um das 30-fache zu verbessern. "

Wissenschaftler sagen, dass es mehr als eintausend miRNAs im menschlichen Körper gibt. Die Deregulation spezifischer miRNAs ist mit einer Krankheit verbunden. Die Messung der Menge an miRNAs in Körperflüssigkeiten kann helfen, Krankheiten, Zustände oder natürliche Entwicklungen wie Schwangerschaft zu diagnostizieren.
Dr. Duelli und sein Team maßen die Quantifizierung von zwei miRNAs: MiR-223, beteiligt an einigen malignen Erkrankungen, Schwangerschaft und anderen Zuständen; und miR-16, das als Tumorsuppressor wirkt und bei einigen Krebsarten, einschließlich Brustkrebs, verloren oder dereguliert ist.
Die Forscherin Sarah Linnstaedt von der Duke University sagte:

"Eine grundlegende Herausforderung für die breite Verfügbarkeit von microRNA-Diagnosen war die Unfähigkeit, genug qualitativ hochwertiges Material für die Analyse zu isolieren. Unser Beitrag beschreibt Wege zur effektiven Sammlung von Blutplasmaproben und bringt uns damit dem Ziel, [miRNA] Diagnosediagnostik zu machen, einen Schritt näher Wirklichkeit."

Die Forscher berichten, dass die Quantifizierung durch die Wahl der Blutentnahmeröhrchen beeinflusst wird. Sie fanden heraus, dass die besten Ergebnisse mit Grautonröhrchen erzielt wurden, die das Antikoagulans Natriumfluorid und Kaliumoxalat (NaF / KOx) enthielten, während traditionelle Grüntop-Röhrchen fast vollständig mit dem miRNA-Nachweis interferierten.
Obwohl miR-16 im Vergleich zu miR-223 im Blutplasma etwa 500-mal besser ist, waren die Ergebnisse für beide vergleichbar, was darauf hindeutet, dass die Detektionsunterschiede, die sich aus der Wahl der Sammlungstechnik ergeben, auch für andere miRNAs gelten. Außerdem wurden mehr variable Ergebnisse bei der Aufnahme von miR-223 im Serum erzeugt, was darauf hindeutet, dass für einige miRNAs die Untersuchung von Blut in Plasmaform bevorzugt ist.

Schließlich sahen die Forscher, dass Unterschiede in der Plasmastruktur zwischen einzelnen Spendern unterschiedliche miRNA-Messungen ergaben.
Dr. Duelli, erklärt:

"Diese Ergebnisse werfen die Möglichkeit auf, dass Faktoren wie Ernährung, Bewegung, zirkadiane Rhythmen und Jahreszeiten, die die Blutchemie verändern, den miRNA-Nachweis und die Quantifizierung beeinflussen könnten.
Die Implikationen dieser Arbeit sind, dass ohne Berücksichtigung der Variablen, die wir identifiziert haben, die miRNA-Quantifizierung von menschlichen Proben für die Zwecke der Biomarkerentwicklung nicht zuverlässig sein kann. Wir bieten Ansätze, die eine zuverlässige Quantifizierung der miRNA-Häufigkeit in Körperflüssigkeiten ermöglichen. "

Geschrieben von Grace Rattue